Rete regionale per il monitoraggio immunologico

 

  • Saggi di linfoproliferazione
  • Elispot
  • Dosaggio di citochine (ELISA e saggi multipli, saggi molecolari su mRNA)
  • Saggi di citotossicità
  • Saggi basati sulla citofluorimetria

Nell’ambito di diversi studi clinici, sono stati messi a punto vari test su sangue periferico utilizzando pannelli complessi per lo studio di una vasta gamma di popolazioni cellulari coinvolte nella risposta immune, per effettuarne quindi un’analisi fenotipica e funzionale tramite saggi multiparametrici:

  • Linfociti B, Linfociti T CD4 e CD8, neutrofili, eosinofili, monociti, cellule natural Killer (NK), NKT, cellule dendritiche (DC), cellule T regolatorie (TREGs), cellule mieloidi soppressori (MDSC), linfociti T γδ
  • Analisi del fenotipo memory-naïve (CD45RA, CCR7, CD4, CD8, CD3)
  • Analisi dello stato di attivazione dei linfociti (PD1, OX40, 4.1BB, ICOS, HLA-DR, CD69)
  • Marcatura con tetrameri specifici per vari antigeni tumorali
  • Marcatura intracellulare delle citochine (ICS) per l’analisi della polifunzionalità delle cellule T Ag-specifiche, in combinazione con marcatura per marker di degranulazione (CD107)
  • Polarizzazione dei linfociti T (Th1, Th2, Th9, Th17, ecc.)
  • Studio e quantificazione delle cellule tumorali circolanti (CTC).
  1. C.M. Ausiello, F. Urbani, A. la Sala, R. Lande, A. Piscitelli and A. Cassone: "Acellular vaccines induce cell-mediated immunity to Bordetella pertussis antigens in infants undergoing primary vaccination against pertussis." Developments in Biological Standardization, Basel, Karger Vol. 89, pp 315-320, 1997.
  2. A. Cassone, C.M. Ausiello, F. Urbani, R. Lande, M. Giuliano, A. la Sala, A. Piscitelli, S. Salmaso, for the "Progetto Pertosse CMI" Working Group:  “Cell mediated and antibody responses to Bordetella pertussis antigens in children vaccinated with acellular or whole-cell pertussis vaccines.” Archive of Pediatrics and  Adolescent Medicine 151: 283-289, 1997.
  3. C.M. Ausiello, F. Urbani, A. la Sala, R. Lande and A. Cassone: “Vaccine- and antigen-dependent type 1 and type 2 cytokine induction after primary vaccination of infants with whole-cell or acellular pertussis vaccines.” Infection and Immunity, 65, 6: 2168-2174, 1997.
  4. C.M. Ausiello, R. Lande, F. Urbani, A. la Sala, P. Stefanelli, S. Salmaso, P. Mastrantonio and A. Cassone: “Cell-mediated immune responses in four-years-old children after primary immunization with acellular pertussis vaccines.” Infection and Immunity, 67, 8: 4064-4071, 1999.
  5. C.M. Ausiello, R. Lande, F. Urbani, B. Di Carlo, P. Stefanelli, S. Salmaso, P. Mastrantonio, and A. Cassone: “Cell-mediated immunity and antibody responses to Bordetella Pertussis antigens in children with a history of pertussis infection and in recipients of an acellular pertussis vaccine.” The Journal of Infectious Diseases, 181:1989-95, 2000.
  6. Di Pucchio T, Pilla L, Capone I, Ferrantini M, Montefiore E, Urbani F, Patuzzo R, Pennacchioli E, Santinami M, Cova A, Sovena G, Arienti F, Lombardo C, Lombardi A, Caporaso P, D'Atri S, Marchetti P, Bonmassar E, Parmiani G, Belardelli F, Rivoltini L. Immunization of Stage IV Melanoma Patients with Melan-A/MART-1 and gp100 Peptides plus IFN-{alpha} Results in the Activation of Specific CD8+ T Cells and Monocyte/Dendritic Cell Precursors. Cancer Res. 2006 May 1;66(9):4943-51.
  7. Rizza P, Capone I, Urbani F, Montefiore E, Rapicetta M, Chionne P, Candido A, Tosti ME, Grimaldi M, Palazzini E, Viscomi G, Cursaro C, Margotti M, Scuteri A, Andreone P, Taylor E, Haygreen EA, Tough DF, Borrow P, Selleri M, Castilletti C, Capobianchi M, Belardelli F. Evaluation of the effects of human leukocyte IFN-alpha on the immune response to the HBV vaccine in healthy unvaccinated individualsVaccine. 2008 Feb 20;26(8):1038-49. doi: 10.1016/j.vaccine.2007.12.044. Epub 2008 Jan 18.
  8. Chemotherapy enhances vaccine-induced antitumor immunity in melanoma patients. Nisticò P, Capone I, Palermo B, Del Bello D, Ferraresi V, Moschella F, Aricò E, Valentini M, Bracci L, Cognetti F, Ciccarese M, Vercillo G, Roselli M, Fossile E, Tosti ME, Wang E, Marincola F, Imberti L, Catricalà C, Natali PG, Belardelli F, Proietti E. Int J Cancer. 2009 Jan 1;124(1):130-9.
  9. Macchia I1, Urbani F, Proietti E. Immune monitoring in cancer vaccine clinical trials: critical issues of functional flow cytometry-based assays..Biomed Res Int. 2013;2013:726239.
  10. Intratumoral injection of IFN-alpha dendritic cells after dacarbazine activates anti-tumor immunity: results from a phase I trial in advanced melanoma. Rozera C, Cappellini GA, D'Agostino G, Santodonato L, Castiello L, Urbani F, Macchia I, Aricò E, Casorelli I, Sestili P, Montefiore E, Monque D, Carlei D, Napolitano M, Rizza P, Moschella F, Buccione C, Belli R, Proietti E, Pavan A, Marchetti P, Belardelli F, Capone I. J Transl Med. 2015 May 2;13:139.
  11. Interferon type I associated with a double peptide vaccine (MART-1 and NY-ESO) can prolong DFS and OS in melanoma patients by activating both adaptive and innate immune response. Results from a phase II, open label, randomized clinical study. Urbani F, Macchia I, et al, paper in preparation.